Determinación de parámetros de cultivo para la evaluación del perfil de susceptibilidad in vitro en Malassezia spp
Malassezia spp. es una levadura que se caracteriza por ser lipodependiente, lo que hace necesario la inclusión de sustancias lipídicas en los medios de cultivo, dificultando la realización de pruebas de susceptibilidad in vitro, ya que por su fisiología se hace imposible la utilización de protocolos...
| Autor Principal: | Torres Duque, Ana Victoria |
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| Formato: | bachelorThesis |
| Publicado: |
Pontificia Universidad Javeriana
2015
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| Materias: | |
| Acceso en línea: |
http://hdl.handle.net/10554/11783 |
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| Sumario: |
Malassezia spp. es una levadura que se caracteriza por ser lipodependiente, lo que hace necesario la inclusión de sustancias lipídicas en los medios de cultivo, dificultando la realización de pruebas de susceptibilidad in vitro, ya que por su fisiología se hace imposible la utilización de protocolos estandarizados como el M27-A propuesto por el CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute). Teniendo en cuenta esta característica fisiológica y por el interés de realizar pruebas de susceptibilidad in vitro para aislamientos clínicos obtenidos de humanos y animales, se propuso evaluar el inóculo y el medio de cultivo para el desarrollo del microorganismo. Para el inóculo, se determinó el emulsionante que permitiera obtener la menor formación de conglomerados celulares bajo los tratamientos de Tween 80 al 0,1, 0,5 y 1%, Tween 40 al 0,5 y 1%, Glicerol al 1% y Tritón al 0,05%. Para el medio de cultivo se evaluaron tres bases de medio: caldo base urea de Christensen, caldo base urea de Christensen suplementado con solución estéril de urea y caldo Sabouraud, con diferentes suplementos lipídicos mediante un factorial recortado (Tween 40, Tween 60, Tween 80 y glicerol). La cuantificación de biomasa se realizó mediante lectura espectrofotométrica a una longitud de onda de 530 nm. El emulsionante del inóculo para obtener suspensiones celulares homogéneas fue agua destilada con Tween 80 al 1%. Como medio de cultivo se estableció el caldo Sabouraud suplementado con Tween 40 al 0,5% y Tween 60 al 0,5% con un tiempo de incubación de 96 horas. |
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