Obtención del perfil electroforetico y evaluación de la actividad antimicrobiana de los extractos proteicos acuosos a partir de hojas y semillas de conyza trihecatactis (fam. asteraceae) ante las cepas de escherichia coli, staphylococcus aureus, listeria monocytogenes, fusarium oxysporium, botrytis sp. y colletotrichum sp.
En la actualidad se han identificado más de 1340 plantas con sustancias antimicrobianas aisladas de sus extractos metabólicos, primarios o secundarios, lo cual promete ser una alternativa al uso de compuestos sintetizados químicamente. Algunas plantas del género Conyza han sido ampliamente estudiada...
| Autor Principal: | Vásquez Tibocha, Juliana Marcela |
|---|---|
| Formato: | bachelorThesis |
| Publicado: |
Pontificia Universidad Javeriana
2015
|
| Materias: | |
| Acceso en línea: |
http://hdl.handle.net/10554/11809 |
| Etiquetas: |
Agregar Etiqueta
Sin Etiquetas, Sea el primero en etiquetar este registro!
|
| Sumario: |
En la actualidad se han identificado más de 1340 plantas con sustancias antimicrobianas aisladas de sus extractos metabólicos, primarios o secundarios, lo cual promete ser una alternativa al uso de compuestos sintetizados químicamente. Algunas plantas del género Conyza han sido ampliamente estudiadas y catalogadas como una posible fuente de compuestos antimicrobianos, sin embargo en el caso de Conyza trihecatactis, nativa de los páramos de Colombia, no se han reportado estudios que demuestren una caracterización del perfil electroforético y la actividad antimicrobiana de sus extractos proteicos, por lo tanto se obtuvo el perfil electroforético y se evaluó la actividad antimicrobiana de hojas y semillas de C. trihecatactis frente a las cepas de Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Fusarium oxysporum, Botrytis sp y Colletotrichum sp. En primer lugar se estableció el porcentaje de saturación de sulfato de amonio (30, 50, 70 y 90%) al cual se recuperaba una mayor cantidad de proteína, obteniendo como resultado un porcentaje del 70% tanto en hojas como en semillas. Posteriormente fueron evaluados tres buffers de extracción: HEPES, Tris-HCl y Fosfato 0,1M y pH 7,5 cada uno, obteniendo la mayor concentración con Fosfato. Adicionalmente tres métodos de obtención de proteínas se ensayaron: TCA/acetona, Fenol-Tris y Sulfato de amonio (70%) con el fin de obtener una resolución del perfil electroforético de mayor calidad. Después de la precipitación con sulfato de amonio al 70% se realizó Cromatografía de intercambio iónico en una columna de Sepharosa (para hojas) y se obtuvo un gel de Tricina-SDS-PAGE con el propósito de observar proteínas de bajo peso molecular. Finalmente, en la actividad antibacteriana se emplearon dos métodos, difusión en agar por pozos y microdilución con TTC, resultando más sensible la técnica de microdilución y se obtuvo actividad antibacteriana del extracto crudo de hojas frente a L. monocytogenes y E.coli. No obstante, en hongos solo se realizó el ensayo de difusión en agar por pozos, sin evidencia de actividad antifúngica. |
|---|