Evaluación y adaptación de un protocolo de extracción y amplificación de ADN en orquídeas conservadas en herbarios en un exsicado de oncidium ornithorhynchum con más de 200 años
Las plantas preservadas en herbarios son una fuente importante de material vegetal, ya que permiten, en principio, acceder a información genética por el ADN que contienen, a partir del cual es posible resolver conceptos y problemas taxonómicos, evolutivos y de distribución de poblaciones. Sin embarg...
| Autor Principal: | Rodríguez García, María Teresa |
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| Formato: | bachelorThesis |
| Publicado: |
Pontificia Universidad Javeriana
2016
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| Materias: | |
| Acceso en línea: |
http://hdl.handle.net/10554/17928 |
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| Sumario: |
Las plantas preservadas en herbarios son una fuente importante de material vegetal, ya que permiten, en principio, acceder a información genética por el ADN que contienen, a partir del cual es posible resolver conceptos y problemas taxonómicos, evolutivos y de distribución de poblaciones. Sin embargo, se dispone de muy pocas referencias metodológicas para la adecuada extracción, amplificación y posterior secuenciación del material genético en plantas preservadas muchos años en estado seco. El presente estudio se realizó con el fin de evaluar y adaptar el protocolo de extracción de ADN propuesto por Mazo (2011), para determinar si este permitía extraer ADN de buena calidad y cantidad a partir de un exsicado de Oncidium ornithorhynchum colectado hace más de 200 años, siendo este ADN susceptible de amplificación por técnicas de PCR para una posterior secuenciación de fragmentos del gen matK con el propósito de ayudar a esclarecer su prioridad taxonómica. Se utilizaron 5 mg de tejidos provenientes de 4 exsicados de orquídeas de O. ornithorhynchum, 3 de ellos preservados en el Herbario de la Pontificia Universidad Javeriana, colectados entre los años 1968 y 2003, y uno de ellos preservado en el Herbario del Museo Nacional de Historia Natural de París, colectado entre 1801 y 1802. Se cuantificaron y midieron las relaciones de pureza ADN/proteína (260/280 y 260/230) de los extraídos, se obtuvieron los productos correspondientes después de su amplificación por PCR, los cuales fueron secuenciados exitosamente. |
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