Epidemiología molecular de Klebsiella pneumoniae productora del gen blaKPC, mediante las técnicas de PFGE y MLST, en cepas de muestras invasivas analizadas en el INSPI-Quito en el periodo 2013-2014
La resistencia a los antimicrobianos ha significado una verdadera amenaza en salud pública, según el primer informe de la Organización Mundial de la Salud, emitido en el año 2014, donde se reportaron numerosas bacterias con fenotipos de multiresistencia (World Health Organization, 2014). En dicho in...
| Autor Principal: | Satán Salazar, Carolina Elizabeth |
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| Otros Autores: | Tamayo Trujillo, Víctor Rafael |
| Formato: | bachelorThesis |
| Idioma: | Spanish / Castilian |
| Publicado: |
PUCE
2016
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| Materias: | |
| Acceso en línea: |
http://repositorio.puce.edu.ec/handle/22000/11413 |
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| Sumario: |
La resistencia a los antimicrobianos ha significado una verdadera amenaza en salud pública, según el primer informe de la Organización Mundial de la Salud, emitido en el año 2014, donde se reportaron numerosas bacterias con fenotipos de multiresistencia (World Health Organization, 2014). En dicho informe se presenta el uso indiscriminado de antibióticos, tanto en tratamientos clínicos y en agricultura, como el principal factor para el desarrollo de resistencia. En este contexto, la presencia de cepas de K. pneumoniae productoras de carbapenemasas tipo KPC se ha incrementado a nivel mundial durante los últimos años (Muñoz-Price et al., 2013). Este microorganismo se asocia a la aparición de brotes intrahospitalarios (Córdova et al., 2012; Gutiérrez et al., 2013; Munoz-Price et al., 2013), provocando un desafío para el personal clínico, al momento de establecer protocolos de control y antibiótico-terapia. (Holta et al, 2015).
Teniendo en cuenta este antecedente, el objetivo de nuestro estudio fue determinar la epidemiología molecular de Klebsiella pneumoniae productora del gen blaKPC (Kpn-KPC), aisladas de 80 muestras invasivas provenientes de distintas casas de salud del Ecuador, receptadas en el laboratorio del Centro de Referencia Nacional de Resistencia a los Antimicrobianos (RAM) del Instituto Nacional de Imvestigación en Salud Pública sede Quito (INSPI-Q), durante periodo 2013-2014. Para lograr este objetivo, en primer lugar se identificó las cepas de acuerdo a los criterios de inclusión, seguido de la confirmación de género y especie de cada una de ellas, en base a pruebas bioquímicas. En segundo lugar se determinó el perfil de susceptibilidad mediante la técnica de Kirby-Bauer, donde se incluyó antibióticos clínicamente útiles e indicadores de mecanismos de resistencia; al mismo tiempo, la producción de carbapenemasas se identificó fenotípicamente mediante 4 métodos: Test de Hodge modificado (THM), Sinergia con Ac. 3-Aminofenil Borónico (APB), Sinergia con EDTA y por el Método de Inactivación del Carbapenémico (CIM). En tercer lugar, la detección genotípica de carbapenemasas se realizó mediante PCR-Múltiplex, investigando los siguientes genes: blaKPC, blaNDM, blaIMP, blaVIM y blaOXA-48. Por último, para establecer relaciones clonales entre las cepas, se utilizó la tipificación molecular por PFGE (Pulse Field Gel Electrophoresis), donde se escogió 42 cepas representativas, teniendo en cuenta sus perfiles de susceptibilidad y el hospital del cual fueron remitidas. De la misma forma, para el desarrollo de MLST (Multi Locus Sequence Typing), se escogieron 14 de las 42 cepas tipificadas por PFGE, teniendo en cuanta los mismos criterios de selección que para PFGE.
Los resultados epidemiológicos arrojados por este estudio, revelan la presencia de infecciones sistémicas causadas por Kpn-KPC en varias casas de salud del Ecuador, identificándose el mayor número de casos, en hospitales de la ciudad de Quito. Se demostró la presencia de Kpn-KPC en varios servicios hospitalarios como: UCI (36,25%), Pediatría (15%), Cirugía General (8,75%) y Unidad de Quemados (5%). En cuanto a los sitios de infección se destaca un mayor número de aislamientos procedentes de sangre (66,25%) y otros líquidos estériles (21,25%).
Las 80 cepas analizadas fueron identificadas en género y especie como Klebsiella pneumoniae, cuyos perfiles de susceptibilidad muestran resistencia a todos los β-lactámicos y otras familias de antibióticos, clasificándolas en las categorías de “multirresistentes” [MDR: 80/80 (100%)], “extensivamente resistentes” [XDR: 74/80 (92,5%)] y posibles “panrresistentes” [PDR: 6/80 (7,5%)]. Todas las cepas analizadas amplificaron para el gen blaKPC, descartando corresistencias con el resto de genes investigados. En cuanto a la identificación fenotípica de carbapenemasas, el THM, el test
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de APB y el CIM, mostraron un nivel de concordancia con PCR del 100%; 97,5% y 100% respectivamente. |
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