Purificación y caracterización de bacteriocinas producidas por dos cepas nativas de Lactobacillus plantarum
Las bacteriocinas son péptidos sintetizados por bacterias acido lácticas que se caracterizan por su capacidad de inhibir el crecimiento de otros microorganismos, especialmente aquellos genéticamente relacionados. Generalmente, las bacteriocinas son de bajo peso molecular y pueden tener un mecanismo...
| Autor Principal: | Amórtegui Díaz, Jairo Emmanuel |
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| Formato: | bachelorThesis |
| Publicado: |
Pontificia Universidad Javeriana
2015
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| Materias: | |
| Acceso en línea: |
http://hdl.handle.net/10554/11844 |
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| Sumario: |
Las bacteriocinas son péptidos sintetizados por bacterias acido lácticas que se caracterizan por su capacidad de inhibir el crecimiento de otros microorganismos, especialmente aquellos genéticamente relacionados. Generalmente, las bacteriocinas son de bajo peso molecular y pueden tener un mecanismo de acción bactericida o bacterioestático. El objetivo del presente trabajo fue el de purificar y caracterizar las bacteriocinas producidas por dos cepas nativas de Lactobacillus plantarum (LE5 y LE27), previamente aisladas a partir de ensilaje de maíz. El sobrenadante libre de células fue purificado mediante precipitación con sulfato de amonio, ultrafiltración, diálisis y liofilización. Las muestras fueron analizadas mediante electroforesis de Tricina-SDS-PAGE, observándose bandas de inferiores 10 kDa con actividad inhibitoria sobre Listeria innocua y Listeria monocytogenes. La caracterización de las bandas por LC-MS/MS mostró que la bacteriocina puede corresponder a una proteína de de 79 aminoácidos y 9,3 kDa presente en otras bacterias ácido lácticas pero sin una función asignada. Posteriormente, se evaluó la actividad antimicrobiana de los extractos y las fracciones purificadas sobre Listeria innocua, Listeria monocytogenes, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli O157:H7, Salmonella enteritidis, Bacillus subtilis, Pseudomonas auriginosa y Leuconostoc citreum, observándose inhibición a L. innocua, L. monocytogenes y E. faecalis. La inhibición generada fue directamente proporcional a la cantidad de proteína en cada muestra, observando mayor actividad antimicrobiana en las fracciones purificadas. Finalmente, la actividad bacteriocina fue caracterizada después del tratamiento con proteinasa K, tripsina y catalasa, al igual que su estabilidad frente SDS, Tween 80, Urea, Triton X-100, EDTA y NaCl, y diferentes temperaturas y pHs, Los resultados mostraron que las bacteriocinas producidas por las dos cepas son estables en un amplio rango de pH (2 12), y temperatiuras, y su función no es alterada por agentes químicos, exceptuando el SDS. En conclusión, este trabajo muestra la caracterización de dos nuevas bacteriocinas aisladas de cepas nativas de L. Plantarum, con potencial para ser utilizadas a nivel industrial. |
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